Kokie yra elektroforetinio apdorojimo standartai?

Kokie yra elektroforetinio apdorojimo standartai?

Pagrindinis elektroforezės principas yra tas, kad ji reiškia įkrautų dalelių migracijos procesą veikiant elektriniam laukui. Daugelis svarbių biomolekulių, tokių kaip aminorūgštys, peptidai, baltymai, nukleotidai, nukleino rūgštys ir kt., turi jonizuojamas grupes, kurios gali turėti teigiamus arba neigiamus krūvius esant tam tikram pH lygiui. Veikiamos elektriniam laukui, šios įkrautos molekulės judės elektrodo kryptimi, priešinga jų krūvio poliškumui.

Elektroforetikos įgūdžiai – tai gebėjimas atskirti, nustatyti arba išvalyti mėginius naudojant elektrinį lauką, dėl kurio įkrautos molekulės juda skirtingu greičiu dėl skirtingų atskiriamo mėginio molekulių įkrautų savybių skirtumų, taip pat skirtumų. pačių molekulių dydžiu, forma ir kitomis savybėmis. Elektroforezės procesą reikia atlikti atraminėje terpėje. Laisvosios sąsajos elektroforezė, kurią atliko Tiselius ir kt. 1937 m. neturėjo fiksuotos atraminės terpės, todėl dispersija ir konvekcija buvo gana stiprios, o tai turėjo įtakos atskyrimo efektui. Taigi atliekama elektroforezė naudojant fiksuotą atraminę terpę, kai mėginys fiksuotoje terpėje atlieka elektroforezės procesą, sumažinant dispersijos ir konvekcijos trukdžius.

Pradinės atraminės terpės buvo filtravimo popierius ir celiuliozės acetato membrana, kurios šiuo metu laboratorijose naudojamos rečiau. Ilgą laiką mažų molekulių medžiagos, tokios kaip aminorūgštys, peptidai, cukrus ir kt., paprastai buvo atskiriamos ir analizuojamos elektroforezės būdu, naudojant kaip terpę filtravimo popierių arba plonasluoksnes celiuliozės ar silikagelio plokšteles. Tačiau šiuo metu analizei dažniausiai naudojami aktyvesni metodai, tokie kaip HPLC. Šios terpės yra tinkamos mažų molekulių medžiagoms atskirti, jos yra paprastos ir patogios. Tačiau netvarkingų biomolekulių atskyrimo efektas yra palyginti menkas. Gelio, kaip pagalbinės terpės, įvedimas labai paskatino elektroforezės įgūdžių ugdymą, todėl elektroforezės įgūdžiai tapo vienu iš svarbių metodų analizuojant biologines makromolekules, tokias kaip baltymai ir nukleino rūgštys.

Elektroforetinis apdorojimas nėra sudėtingas, tačiau taip pat turime žinoti, kad elektroforeziniam apdorojimui yra tam tikri standartai, kitaip mes nežinome, ar kokybė yra kvalifikuota. Taigi, kokie yra šio elektroforetinio apdorojimo standartai?

1. Lygus paviršius

Tai yra pagrindinė sąlyga, jei paviršius nėra lygus, tada prarandama pagrindinė kvalifikacija;

2. Vienodo storio

Elektroforetiniam apdorojimui reikia užtikrinti vienodą storį, kad neatsirastų spalvų skirtumų;

3. Paviršiuje nėra akivaizdžių įtrūkimų